TGFB1活化劑
使用說(shuō)明書(shū)
僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
第1版(2016年04月修訂)
關(guān)聯(lián)信息
機(jī)體內(nèi)細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的 TGF-β為非活性同型二聚體的前體分子。合成后, TGF-β同型二聚體與延遲相關(guān)肽(Latency Associated Peptide,LAP)(轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因 子β N 端皆具有一個(gè)長(zhǎng) 20~30 個(gè)氨基酸序列)形成的復(fù)合稱為小潛伏復(fù)合物 (Small Latent Complex,SLC)。在細(xì)胞內(nèi),SLC 與 TGF-β結(jié)合蛋白(Latent TGF-β-Binding Protein,LTBP)結(jié)合形成了復(fù)雜的大潛在復(fù)合物(Large Latent Complex,LLC)。TGF-β以 LLC 的形式由細(xì)胞分泌到細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)。也就是說(shuō)在血清血漿等生物樣本中,大多數(shù) TGF-β是以 LLC 的 形式存在,活化試劑適用于樣本前處理,釋放 TGF-β,即 TGF-β 與結(jié)合蛋白解離成游離的 TGF-β蛋白,達(dá)到定量檢測(cè)生物樣本中的TGF-β的目的。
試劑
試劑 | 規(guī)格 |
活化試劑A | 20mL(1×) |
活化試劑B | 20mL(1×) |
預(yù)期應(yīng)用
適用于血清/血漿/細(xì)胞上清液[說(shuō)明書(shū)中目前只有這三種樣本的活化方法。]等樣本前處理,釋放 TGF-β,使 TGF-β 與結(jié)合蛋白解離成游離的 TGF-β蛋白,用于后期定量檢測(cè)的目的。
樣本活化步驟
1、 血清/血漿
1) 取50μL樣本,加入10μL 活化劑A,混勻。
2) 室溫靜置10min。
3) 加入10μL活化劑B,混勻。
4) 加入80μL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,混勻后即可檢測(cè)(2h內(nèi)檢測(cè))。
5) 計(jì)算結(jié)果時(shí)應(yīng)乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)(3)。
2、 細(xì)胞培養(yǎng)上清
1) 取100μL細(xì)胞培養(yǎng)上清,加入20μL 活化劑A,混勻。
2) 室溫靜置10min。
3) 加入20μL 活化劑B,混勻后即可檢測(cè)(2h內(nèi)檢測(cè))。
4) 計(jì)算結(jié)果時(shí)應(yīng)乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)(1.4)。