慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)服務(wù)
使用說明書
僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
第1版(2016年04月修訂)
[關(guān)聯(lián)信息]
?? 慢病毒包裝系統(tǒng)采用的是人工改造過后的HIV病毒系統(tǒng),包括1個(gè)表達(dá)質(zhì)粒和多個(gè)輔助質(zhì)粒,通常采用293T細(xì)胞作為宿主繁育病毒,通過離心.超濾等過程制備和富集重組慢病毒顆粒,完成慢病毒的包裝過程。包裝好的重組病毒侵染細(xì)胞,將目的基因隨機(jī)、穩(wěn)定的插入宿主細(xì)胞基因組,實(shí)現(xiàn)目的基因快速、穩(wěn)定的表達(dá)。通過篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系,在生物發(fā)酵技術(shù)的幫助下,便能實(shí)現(xiàn)重組蛋白大批量的制備。??
[服務(wù)項(xiàng)目內(nèi)容]
??項(xiàng)目內(nèi)容?? | ??實(shí)驗(yàn)流程?? | ??周期?? |
??實(shí)驗(yàn)方案確定?? | ??1. 客戶信息分析 ??2. 實(shí)驗(yàn)方案確定???? | ??1周?? |
??目的基因獲取?? | ??1. PCR獲取目的基因片段?? ??2. 基因化學(xué)合成?? | ??2-4周?? |
??載體構(gòu)建?? | ??1. 載體構(gòu)建?? ??2. 質(zhì)粒提取和去內(nèi)毒素處理?? | ??2-3周?? |
? ??共轉(zhuǎn)??染 | ??1. 表達(dá)質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞?? ??2. 細(xì)胞培養(yǎng)?? | ??1周?? |
??重組病毒收集?? | ??1. 重組病毒收集、濃縮、分裝和保存?? ??2. 重組病毒滴度檢測?? | ??1周?? |
[客戶提供信息]
??1. 目的基因及其相關(guān)片段的DNA序列的詳細(xì)信息;
??2. 客戶的具體要求。????
[反饋客戶內(nèi)容]
??1. 實(shí)驗(yàn)方案;??
??2. 基因克隆陽性質(zhì)粒;??
??3. 滴度≥1*108TU/ml的重組病毒儲(chǔ)液。