細(xì)胞增殖和毒性檢測服務(wù)
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僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
第1版(2016年04月修訂)
方法 | 原理 | 適用范圍 | 優(yōu)點 | 缺點 |
MTT | 活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細(xì)胞中的甲瓚,用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。 | 廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、細(xì)胞增殖測定、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等 | 靈敏度高、價格經(jīng)濟(jì)實惠 | MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物不溶于水,需被溶解后才能檢測。這不僅使檢測時的工作量增加,也會對實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響,而且溶解甲瓚的有機(jī)溶劑有毒性。 |
CCK-8 | WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。用酶聯(lián)免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。 | 廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞增殖試驗、細(xì)胞毒性試驗以及藥敏試驗等 | 1、使用方便,省去了洗滌細(xì)胞,不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑; 2、能快速檢測; 3、靈敏度很高,甚至可以測定較低細(xì)胞密度; 4、重復(fù)性優(yōu)于MTT法; 5、對細(xì)胞毒性??; 6、檢測試劑中為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用。 | 1、價格比較貴。 2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。 |
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