細胞克隆形成實驗服務

使用說明書

僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

第1版（2016年04月修訂）

【服務內(nèi)容】

細胞克隆形成率即細胞接種存活率，表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數(shù)量。貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆，而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞?？寺⌒纬陕史从臣毎后w依賴性和增殖能力兩個重要性狀。

【項目和周期】

項目內(nèi)容：

1、取對數(shù)生長期的各組細胞，分別用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成單個細胞，并把細胞懸浮在10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液中備用。

2、將細胞懸液作梯度倍數(shù)稀釋，每組細胞分別以每皿100或200個細胞的梯度密度分別接種含37℃預溫培養(yǎng)液的皿中或者6孔板中，并輕輕轉(zhuǎn)動，使細胞分散均勻。置37℃ 5% CO2及飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2～3周。

3、經(jīng)常觀察，當出現(xiàn)肉眼可見的克隆時，終止培養(yǎng)。加4%多聚甲醛固定細胞5mL固定15分鐘。然后去固定液，加適量吉姆薩染色液染10～30分鐘，然后用流水緩慢洗去染色液，空氣干燥。

4、將平皿在顯微鏡（低倍鏡）計數(shù)大于10個細胞的克隆數(shù)。最后計算克隆形成率。

          克隆形成率 =（克隆數(shù)/接種細胞數(shù)）×100%。

周期：2~3周

【客戶提供的材料】

 1.待檢測或處理的細胞；如果常見的人和大小鼠細胞系，公司可免費提供。

 2.細胞處理的相關(guān)藥物和實驗方案；

【反饋給客戶結(jié)果】

 1、提供相應實驗數(shù)據(jù)和圖表；

 2、提供具體的實驗報告；