蘇木素-伊紅染色液

使用說明書

僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

第1版（2016年04月修訂）

[關聯(lián)信息]

HE染色法采用兩種染料即堿性染料蘇木素和酸性染料伊紅分別于細胞核和細胞質發(fā)生作用，使細胞的微細結構通過顏色而改變它的折光率，從而在光鏡下能清晰地呈現(xiàn)出細胞圖像。組織細胞內含有酸性物質和堿性物質，其中酸性細胞核會被堿性的蘇木素染成藍色，而堿性的胞漿被會被酸性染料伊紅染成紅色，從而使得胞核呈藍色，胞漿呈紅色。

[制品內容]

編號	名稱	規(guī)格
IS098-1	蘇木素染液工作液	100ml
IS098-2	伊紅染液工作液	100ml

[儲存及有效期]

低溫陰涼處保存，有效期一年。

[使用方法]

以下步驟僅供參考

（一）石蠟切片染色

1. 取材組織塊，經(jīng)固定后，常規(guī)石蠟包埋，切片。

2. 石蠟切片脫蠟水化：

①二甲苯（I）中脫蠟10min。

②換用新鮮的二甲苯（Ⅱ），再脫蠟10min。

③無水乙醇 5 min。

④95%乙醇 2min。

⑤80％乙醇 2min

⑥70%乙醇 2min。

⑦蒸餾水   2min。

3. 蘇木素染液染色5-10min(具體時間根據(jù)染色結果和實驗要求調整)，蒸餾水沖洗。

4. 分化液分化3s, 自來水沖洗干凈。

5. 自來流水沖洗5-10min      。

6. 置伊紅染液1min-2min(具體時間根據(jù)染色結果和實驗要求調整)。

7. 蒸餾水浸泡 15s。

8. 脫水，透明，封片：

①95％乙醇（I）30s

②95％乙醇（Ⅱ）30s

③100％乙醇（I）1min

④100％乙醇（Ⅱ）1min

⑥二甲苯（I）10min

⑦二甲苯（Ⅱ）10min

⑧中性樹膠封固，鏡下觀察。

（二）冰凍切片染色（快速染色法）

1. 將冰凍切片置于固定液中固定30s－1min。

2. 蒸餾水沖洗。

3. 置于蘇木素染液工作液染色3－5min。

4. 分化液分化3s。

5. 蒸餾水浸泡 15min 或溫水（約 50℃）5min。

6. 置伊紅染液10-20s (具體時間根據(jù)染色結果和實驗要求調整)，蒸餾水沖洗。

7. 脫水，透明，封片。（步驟同石蠟切片）

[注意事項]

1、石蠟切片脫蠟應盡量干凈，操作過程中使用的乙醇需經(jīng)常更換新液。

2、安排好預實驗，確定好染色的時間，通常只需能夠分辨細胞核即可，顏色過深有可能影響細胞質顏色。

3、冰凍切片染色時間盡量縮短，避免染色過量使得結果不好分析。

4、低溫情況下分化液可能會產(chǎn)生些許沉淀。如果發(fā)現(xiàn)有沉淀產(chǎn)生，請置于37℃水浴至完全溶解后使用。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作并嚴格按照實驗室安全操作手冊進行。

6、伊紅在純水和梯度酒精脫水的時候容易褪色，后期脫水不宜在梯度酒精浸泡太久。