25-羥基維生素D3(HVD3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
ELISA Kit for 25-Hydroxyvitamin D3 (HVD3)
25-HVD3; 25HVD3; Calcifediol; Calcidiol; H-VD3; 25-Hydroxycholecalciferol; 25-Hydroxy Vitamin D3; 25(OH)D
- 編號CEA915Ge
- 物種Pan-species (General,通用) 相同的名稱,不同的物種。
- 實(shí)驗(yàn)方法競爭抑制
- 反應(yīng)時長2h
- 檢測范圍6.17-500ng/mL
- 靈敏度最小可檢測劑量小于等于2.77ng/mL.
- 樣本類型Serum, plasma and other biological fluids
- 下載 英文說明書 中文說明書
- 規(guī)格 48T96T 96T*5 96T*10 96T*100
- 價格 ¥ 3342 ¥ 4774 ¥ 21481 ¥ 40576 ¥ 334152
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特異性
本試劑盒用于檢測25-羥基維生素D3(HVD3),經(jīng)檢測與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應(yīng)。
由于受到技術(shù)及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測,因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。
回收率
分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的25-羥基維生素D3(HVD3)(加標(biāo)樣品),重復(fù)測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。
樣本 | 回收率范圍(%) | 平均回收率(%) |
serum(n=5) | 99-105 | 102 |
EDTA plasma(n=5) | 78-89 | 85 |
heparin plasma(n=5) | 93-105 | 98 |
精密度
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差: CV<10%
批間差: CV<12%
線性
在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的25-羥基維生素D3(HVD3),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中25-羥基維生素D3(HVD3)含量的測定值與理論值的比率。
樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
serum(n=5) | 82-91% | 81-104% | 87-99% | 91-101% |
EDTA plasma(n=5) | 80-95% | 83-102% | 79-99% | 97-104% |
heparin plasma(n=5) | 86-104% | 90-97% | 93-105% | 78-98% |
穩(wěn)定性
經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。
實(shí)驗(yàn)流程
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)50µL,
加入50µL檢測液A(臨用前配制);
37°C溫育1小時。
3. 洗板3次;
4. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
5. 洗板5次;
6. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
7. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用競爭抑制酶聯(lián)免疫分析法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。將HVD3單克隆抗體包被微孔板,制成固相載 體,往包被抗體的微孔中同時加入生物素標(biāo)記的HVD3類似物和待測抗原(標(biāo)準(zhǔn)品或樣本),待測抗原與生物素標(biāo)記HVD3類似物對特異性抗體進(jìn)行競爭結(jié)合。溫育后經(jīng)洗滌去掉未結(jié)合物,然后加入HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過溫育和徹底洗滌后加入底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。待測標(biāo)本濃度越高,標(biāo)記抗原和抗體的結(jié)合就越受到抑制,顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關(guān),而與樣品中待測物質(zhì)含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
相關(guān)產(chǎn)品
編號 | 適用物種:Pan-species (General,通用) | 應(yīng)用(僅供研究使用,不用于臨床診斷!) |
CPA915Ge11 | 25-羥基維生素D3(HVD3)牛血清白蛋白偶聯(lián)物 | Immunogen; SDS-PAGE; WB. |
CPA915Ge21 | 25-羥基維生素D3(HVD3)卵白蛋白偶聯(lián)物 | Immunogen; SDS-PAGE; WB. |
PAA915Ge01 | 25-羥基維生素D3(HVD3)多克隆抗體 | WB; IHC; ICC; IP. |
LAA915Ge71 | 25-羥基維生素D3(HVD3)多克隆抗體(生物素標(biāo)記) | WB; IHC; ICC. |
MAA915Ge22 | 25-羥基維生素D3(HVD3)單克隆抗體 | ELISA, CLIA. / IHC-Fr, ICC, IP (predicted). |
MAA915Ge21 | 25-羥基維生素D3(HVD3)單克隆抗體 | ELISA, CLIA. / IHC-Fr, ICC, IP (predicted). |
CEA915Ge | 25-羥基維生素D3(HVD3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) | Enzyme-linked immunosorbent assay for Antigen Detection. |
LMA915Ge | 25-羥基維生素D3(HVD3)等多因子檢測試劑盒(流式熒光發(fā)光法) | FLIA Kit for Antigen Detection. |
KSA915Ge11 | 25-羥基維生素D3(HVD3)檢測試劑盒DIY材料(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) | Main materials for "Do It (ELISA Kit) Yourself". |
參考文獻(xiàn)
雜志 | 參考文獻(xiàn) |
Allergy & Clinical Immunology | Decreased serum LL-37 and vitamin D3 levels in atopic dermatitis: relationship between IL-31 and oncostatin M [Wiley: source] |
Tianjin Med J | 成人哮喘血清維生素D 水平與肺功能相關(guān)因素分析 [Jwk_Tjyy: Cn] |
Journal of Functional Foods | Comparative effects of brown and golden flaxseeds on body composition, inflammation and bone remodelling biomarkers in perimenopausal overweight women [S1756464617301561] |
J Nutr Biochem. | Chronic maternal calcium and 25-hydroxyvitamin D deficiency in Wistar rats programs abnormal hepatic gene expression leading to hepatic steatosis in female offspring. [pubmed:28219837] |
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Asia pacific allergy | Serum 25-hydroxyvitamin D inversely associated with blood eosinophils in patients with persistent allergic rhinitis. [pubmed:29094019] |
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JOURNAL OF STEROID BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY | Circulating Osteocyte‐Related Biomarkers (vitamin D, sclerostin, dickkopf-1), hepcidin, and oxidative stress markers in early breast cancer: their impact in?… [Pubmed: 33065276] |
The Journal of Obstetrics and Gynecology of India | The Effects of Follicular Fluid 25 (OH) D Concentration on Intrafollicular Estradiol Level, Oocyte Quality, and Fertilization Rate in Women Who Underwent IVF Program [] |