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β-羥丁酸(bHB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

ELISA Kit for Beta-Hydroxybutyric Acid (bHB)

OHB; BHBA; Beta-Hydroxybutyrate; 3-Hydroxybutyric Acid; β-Hydroxybutyric acid

  • β-羥丁酸(bHB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • β-羥丁酸(bHB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 產(chǎn)品包裝(模擬)
  • β-羥丁酸(bHB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖
  • CEB022Ge.jpg 標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
  • Certificate 通過(guò)ISO 9001、ISO 13485質(zhì)量體系認(rèn)證

特異性

本試劑盒用于檢測(cè)β-羥丁酸(bHB)，經(jīng)檢測(cè)與其它相似物質(zhì)無(wú)明顯交叉反應(yīng)。
由于受到技術(shù)及樣本來(lái)源的限制，不可能完成對(duì)所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測(cè)，因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測(cè)的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的β-羥丁酸(bHB)（加標(biāo)樣品），重復(fù)測(cè)定并計(jì)算其均值，回收率為測(cè)定值與理論值的比率。

樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 86-97 90
EDTA plasma(n=5) 89-105 98
heparin plasma(n=5) 81-90 85

精密度

精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差：取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20 次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差：選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測(cè)定，每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差： CV<10%
批間差： CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的β-羥丁酸(bHB)，并倍比稀釋成1:2，1:4，1:8，1:16的待測(cè)樣本，線性范圍即為稀釋后樣本中β-羥丁酸(bHB)含量的測(cè)定值與理論值的比率。

樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 90-97% 97-105% 97-105% 96-104%
EDTA plasma(n=5) 84-92% 95-103% 95-103% 86-101%
heparin plasma(n=5) 85-102% 84-103% 79-89% 95-105%

穩(wěn)定性

經(jīng)測(cè)定，試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響，實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來(lái)進(jìn)行操作可減少人為誤差。

實(shí)驗(yàn)流程

1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）50µL，
    加入50µL檢測(cè)液A(臨用前配制);
    37°C溫育1小時(shí)。
3. 洗板3次；
4. 加檢測(cè)溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
5. 洗板5次；
6. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
7. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)抑制酶聯(lián)免疫分析法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)水平。將β-羥丁酸(bHB)單克隆抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗體的微孔中同時(shí)加入生物素標(biāo)記的抗原和待測(cè)抗原(標(biāo)準(zhǔn)品或樣本)，待測(cè)抗原與生物素標(biāo)記抗原對(duì)特異性抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。溫育后經(jīng)洗滌去掉未結(jié)合物，然后加入HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)溫育和徹底洗滌后加入底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。待測(cè)標(biāo)本濃度越高，標(biāo)記抗原和抗體的結(jié)合就越受到抑制，顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關(guān)，而與樣品中待測(cè)物質(zhì)含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（O.D.值），計(jì)算樣品濃度。

相關(guān)產(chǎn)品

編號(hào) 適用物種：Pan-species (General，通用) 應(yīng)用(僅供研究使用，不用于臨床診斷！)
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參考文獻(xiàn)

雜志 參考文獻(xiàn)
Endocrinology Orphan nuclear receptor Nur77 mediates fasting-induced hepatic fibroblast growth factor 21 expression [Endocrine:Source]
Chem Commun (Camb) A bioelectronic system for insulin release triggered by ketone body mimicking diabetic ketoacidosis in vitro [PubMed: 25846235]
PLoS One Regulation of Nutritional Metabolism in Transition Dairy Cows: Energy Homeostasis and Health in Response to Post-Ruminal Choline and Methionine [pubmed:27501393]
Buffalo Bulletin Alterations in haemato-biochemical profile following by-pass nutrients supplementation in early lactating Murrah buffaloes []
Journal of Integrative Agriculture Temporal dynamics of nutrient balance, plasma biochemical and immune traits, and liver function in transition dairy cows []
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