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α1-抗胰蛋白酶(a1AT)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)

CLIA Kit for Alpha-1-Antitrypsin (a1AT)

SERPINA1; SPAAT; A1-AT; PI; Serpin Peptidase Inhibitor,Clade A(Alpha-1 Antiproteinase/AntiTrypsin)Member 1; Alpha-1 protease inhibitor; Short peptide from AAT; Serpin A1

  • α1-抗胰蛋白酶(a1AT)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) 產品包裝(模擬)
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  • α1-抗胰蛋白酶(a1AT)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法) 實驗結果圖
  • SCB697Hu.jpg 標準曲線圖
  • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證

特異性

本試劑盒用于檢測α1-抗胰蛋白酶(a1AT),經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的α1-抗胰蛋白酶(a1AT)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。

樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 78-91 80
EDTA plasma(n=5) 81-93 88
heparin plasma(n=5) 80-88 84

精密度

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差: CV<10%
批間差: CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內加入適量的α1-抗胰蛋白酶(a1AT),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中α1-抗胰蛋白酶(a1AT)含量的測定值與理論值的比率。

樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 86-102% 80-95% 88-99% 81-101%
EDTA plasma(n=5) 82-105% 86-104% 83-101% 79-91%
heparin plasma(n=5) 97-105% 88-95% 78-90% 79-102%

穩(wěn)定性

經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

實驗流程

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加底物100µL,37°C孵育10分鐘;
8. 讀數(shù)。

實驗原理

將α1-抗胰蛋白酶(a1AT)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的α1-抗胰蛋白酶(a1AT)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的α1-抗胰蛋白酶(a1AT)抗體,將未結合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次徹底洗滌后加入底物。加入底物后會產生輝光型光信號。發(fā)射光強度和樣品中的α1-抗胰蛋白酶(a1AT)呈正相關。用化學發(fā)光儀測定相對光單位(RLU),計算樣品濃度。

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參考文獻

雜志 參考文獻
Journal of Biotechnology Expression and characterization of recombinant human alpha-antitrypsin in transgenic rice seed [PubMed: 23376844]
Sci Rep Hepatic steatosis depresses alpha-1-antitrypsin levels in human and rat acute pancreatitis [PubMed: 26634430]
PLoS One Gut Microbial Dysbiosis May Predict Diarrhea and Fatigue in Patients Undergoing Pelvic Cancer Radiotherapy: A Pilot Study [PubMed: 25955845]
Respir Care Diagnostic Utility of Biomarkers in COPD [PubMed: 26106205]
Acta?Anaesthesiologica Scandinavica Early prognostic factors in septic shock cancer patients: a prospective study with a proteomic approach [Pubmed:29315472]
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Pediatrics International Prenatal diagnosis of maternal serum from mothers carrying β‐thalassemic fetus [34559910]
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