鈣網(wǎng)蛋白(CALR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
ELISA Kit for Calreticulin (CALR)
CRT; RO; SSA; CC1qR; ERp60; HACBP; grp60; CRTC; CRP55; Calregulin; Sicca Syndrome Antigen A; Autoantigen Ro; Endoplasmic reticulum resident protein 60
- 編號(hào)CEB486Hu
- 物種Homo sapiens (Human,人) 相同的名稱,不同的物種。
- 實(shí)驗(yàn)方法競(jìng)爭(zhēng)抑制
- 反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)2h
- 檢測(cè)范圍2.47-200ng/mL
- 靈敏度最小可檢測(cè)劑量小于等于0.87ng/mL.
- 樣本類型Serum, plasma, tissue homogenates, cell lysates, cell culture supernates and other biological fluids
- 下載 英文說明書 中文說明書
- 規(guī)格 48T96T 96T*5 96T*10 96T*100
- 價(jià)格 ¥ 2650 ¥ 3786 ¥ 17037 ¥ 32181 ¥ 265020
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特異性
本試劑盒用于檢測(cè)鈣網(wǎng)蛋白(CALR),經(jīng)檢測(cè)與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應(yīng)。
由于受到技術(shù)及樣本來源的限制,不可能完成對(duì)所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測(cè),因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測(cè)的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。
回收率
分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的鈣網(wǎng)蛋白(CALR)(加標(biāo)樣品),重復(fù)測(cè)定并計(jì)算其均值,回收率為測(cè)定值與理論值的比率。
樣本 | 回收率范圍(%) | 平均回收率(%) |
serum(n=5) | 91-104 | 99 |
EDTA plasma(n=5) | 92-105 | 99 |
heparin plasma(n=5) | 91-104 | 97 |
精密度
精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20 次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差: CV<10%
批間差: CV<12%
線性
在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的鈣網(wǎng)蛋白(CALR),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測(cè)樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中鈣網(wǎng)蛋白(CALR)含量的測(cè)定值與理論值的比率。
樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
serum(n=5) | 78-103% | 94-101% | 89-96% | 80-97% |
EDTA plasma(n=5) | 78-95% | 96-103% | 78-103% | 90-99% |
heparin plasma(n=5) | 98-105% | 88-102% | 94-103% | 79-88% |
穩(wěn)定性
經(jīng)測(cè)定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。
實(shí)驗(yàn)流程
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)50µL,
加入50µL檢測(cè)液A(臨用前配制);
37°C溫育1小時(shí)。
3. 洗板3次;
4. 加檢測(cè)溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
5. 洗板5次;
6. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
7. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用競(jìng)爭(zhēng)抑制酶聯(lián)免疫分析法測(cè)定標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)水平。將鈣網(wǎng)蛋白(CALR)單克隆抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中同時(shí)加入生物素標(biāo)記的抗原和待測(cè)抗原(標(biāo)準(zhǔn)品或樣本),待測(cè)抗原與生物素標(biāo)記抗原對(duì)特異性抗體進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。溫育后經(jīng)洗滌去掉未結(jié)合物,然后加入HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過溫育和徹底洗滌后加入底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。待測(cè)標(biāo)本濃度越高,標(biāo)記抗原和抗體的結(jié)合就越受到抑制,顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關(guān),而與樣品中待測(cè)物質(zhì)含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。
贈(zèng)品
增值服務(wù)
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編號(hào) | 適用物種:Homo sapiens (Human,人) | 應(yīng)用(僅供研究使用,不用于臨床診斷!) |
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參考文獻(xiàn)
雜志 | 參考文獻(xiàn) |
Journal of Investigative Dermatology | Oxidative Stress-Induced Calreticulin Expression and Translocation: New Insights into the Destruction of Melanocytes [Pubmed: 23771121] |
International Journal of Molecular Sciences | The Anticoagulant Effect of PGI2S and tPA in Transgenic Umbilical Vein Endothelial Cells Is Linked to Up-Regulation of PKA and PKC [Mdpi: Source] |
The Journal of Maternal-Fetal & Neonatal Medicine | Amniotic fluid calreticulin in pregnancies complicated by the preterm prelabor rupture of membranes [Pubmed:26953684] |
journal of maternal-fetal & neonatal medicine | Cervical fluid calreticulin and cathepsin-G in pregnancies complicated by preterm prelabor rupture of membranes. [pubmed:28152632] |
Talanta | Investigation of the interaction between calreticulin and immunoglobulin G by capillary electrophoresis and computer modeling [Doi: 10.1016/j.talanta.2018.11.098] |
Sci Adv | Thermostable ionizable lipid-like nanoparticle (iLAND) for RNAi treatment of hyperlipidemia [Pubmed:35171673] |