泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
ELISA Kit for Ubiquitin (Ub)
Ubiquitin B; UbB; Ubiquitous Immunopoietic Polypeptide; Polyubiquitin B
- 編號CEA164Mi
- 物種Homo sapiens (Human,人), Mus musculus (Mouse,小鼠), Rattus norvegicus (Rat,大鼠), Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔), Canis familiaris; Canine (Dog,犬), Sus scrofa; Porcine (Pig,豬), Bos taurus; Bovine (Cattle,牛), Equus caballus; Equine (Horse,馬) 相同的名稱,不同的物種。
- 實驗方法競爭抑制
- 反應時長2h
- 檢測范圍4.94-400ng/mL
- 靈敏度最小可檢測劑量小于等于1.69ng/mL.
- 樣本類型serum, plasma, tissue homogenates, cell lysates, cell culture supernates and other biological fluids
- 下載 英文說明書 中文說明書
- 規(guī)格 48T96T 96T*5 96T*10 96T*100
- 價格 ¥ 2722 ¥ 3888 ¥ 17496 ¥ 33048 ¥ 272160
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特異性
本試劑盒對檢測泛素(Ub)具有較高的靈敏度。
經檢測人、小鼠、大鼠、兔、犬、豬、牛、馬之間有100%的交叉反映。
回收率
分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的泛素(Ub)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。
樣本 | 回收率范圍(%) | 平均回收率(%) |
serum(n=5) | 78-104 | 93 |
EDTA plasma(n=5) | 83-96 | 92 |
heparin plasma(n=5) | 92-101 | 96 |
精密度
精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差: CV<10%
批間差: CV<12%
線性
在定值血清及血漿樣本內加入適量的泛素(Ub),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中泛素(Ub)含量的測定值與理論值的比率。
樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
serum(n=5) | 88-105% | 90-99% | 94-103% | 94-101% |
EDTA plasma(n=5) | 87-95% | 79-92% | 95-103% | 89-101% |
heparin plasma(n=5) | 81-101% | 90-98% | 86-95% | 88-101% |
穩(wěn)定性
經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
實驗流程
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)50µL,
加入50µL檢測液A(臨用前配制);
37°C溫育1小時。
3. 洗板3次;
4. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
5. 洗板5次;
6. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
7. 加終止液50µL,立即450nm讀數。
實驗原理
本試劑盒應用競爭抑制酶聯免疫分析法測定標本中待測物質水平。將泛素(Ub)單克隆抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中同時加入生物素標記的抗原和待測抗原(標準品或樣本),待測抗原與生物素標記抗原對特異性抗體進行競爭結合。溫育后經洗滌去掉未結合物,然后加入HRP標記的親和素,經過溫育和徹底洗滌后加入底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。待測標本濃度越高,標記抗原和抗體的結合就越受到抑制,顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關,而與樣品中待測物質含量呈負相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
增值服務
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編號 | 適用物種:Homo sapiens (Human,人), Mus musculus (Mouse,小鼠), Rattus norvegicus (Rat,大鼠), Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔), Canis familiaris; Canine (Dog,犬), Sus scrofa; Porcine (Pig,豬), Bos taurus; Bovine (Cattle,牛), Equus caballus; Equine (Horse,馬) | 應用(僅供研究使用,不用于臨床診斷!) |
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參考文獻
雜志 | 參考文獻 |
Breast Cancer Res Treat | Activation of mitochondrial unfolded protein response is associated with Her2-overexpression breast cancer [Pubmed: 32601970] |
J Cachexia Sarcopenia Muscle | Systemic ablation of vitamin D receptor leads to skeletal muscle glycogen storage disorder in mice [34877816] |