自然流產(chǎn)(SA)小鼠模型
Mouse Model for Spontaneous Abortion (SA)
RSA;Miscarriage; Pregnancy loss;Recurren Spontaneous Abortion
- 編號(hào)DSI638Mu01
- 物種Mus musculus (Mouse,小鼠) 相同的名稱,不同的物種。
- 原型物種人
- 來源Clark經(jīng)典反復(fù)流產(chǎn)小鼠模型(CBA/J與DBA/2)
- 模式動(dòng)物品系雌性CBA/J,雄性DBA/2,雄性BALB/c小鼠
- 實(shí)驗(yàn)分組正常妊娠對(duì)照組,健康未妊娠對(duì)照組,RSA模型組,RSA治療組
- 實(shí)驗(yàn)周期6~8 weeks
- 建模方法RSA小鼠模型建立
將雌性CBA/J與雄性BALB/c小鼠按2:1比例合籠交配建立正常妊娠小鼠模型,雌性CBA/J小鼠與雄性DBA/2小鼠按2:1比例合籠交配建立(復(fù)發(fā)性流產(chǎn))RSA小鼠模型,檢出陰栓者計(jì)為妊娠第0天。
實(shí)驗(yàn)共分4組:
治療組(雌性CBA/J 10只、雄性DBA/2 5只)
RSA模型組(雌性CBA/J 10只、雄性DBA/2 5只)
正常妊娠對(duì)照組 (雌性CBA/J 10只、雄性BALB/c 5只)
健康未妊娠對(duì)照組(雌性CBA/J 10只)
各組從妊娠第0日開始灌胃給藥,每組10只雌鼠。
劑量根據(jù)成人70kg臨床用藥劑量按動(dòng)物體表面積換算,灌胃容積均為0.4mL/20g。正常妊娠組和RSA模型對(duì)照組給予相同體積蒸餾水,連續(xù)灌胃給藥14d,末次給藥1h后處死小鼠,取其外周血和蛻膜組織。 - 應(yīng)用可用于研究預(yù)防和治療RSA的藥物
- 下載 英文說明書 中文說明書
- 規(guī)格 每例
- 價(jià)格 ¥ 1440
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模型評(píng)價(jià)
流式細(xì)胞數(shù)檢測(cè)PBMCs中Th17/Treg細(xì)胞比例:
分離小鼠PBMCs后,按工作濃度加入佛波酯,Ionomycin,Monensin,37°C孵育4~6h,設(shè)同型對(duì)照管和檢測(cè)管。Fc受體阻斷劑封閉后,分別加入CD4表面抗體染色,混勻,室溫避光孵育15min后每管按操作要求先后加入固定液和破膜/溶血液,洗滌后實(shí)驗(yàn)管分別加入2種配色抗體,對(duì)照管加入同型對(duì)照抗體。避光孵育后,加入洗滌劑離心棄上清,重懸細(xì)胞,24h內(nèi)上機(jī)檢測(cè)。以CD4直方圖射門,以散點(diǎn)圖染色陽性表示Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞,用Cellsquest軟件獲取并分析數(shù)據(jù)。(一個(gè)樣本分為兩種染色方案,Th17:CD4-FITC、IL-17-PE;Treg:CD4-FITC、CD25-APC、Foxp3-PE)
RT-PCR檢測(cè)PBMCs中FOXP3、RORrt、STAT3、STAT5的表達(dá):
分別提取各組PBMCs總RNA,并進(jìn)行RNA純度和完整性鑒定;設(shè)計(jì)引物,逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,以β-actin為內(nèi)參,然后進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR;采用相對(duì)定量法利用Ct計(jì)算FOXP3、RORrt、STAT3、STAT5 mRNA的相對(duì)量。
組織病理學(xué)
1.HE染色觀察局部組織細(xì)胞病理結(jié)構(gòu)改變:
取各組小鼠蛻膜組織,包埋石蠟切片,HE染色。
2.電鏡觀察局部組織細(xì)胞凋亡和病理結(jié)構(gòu)改變:
無菌取各組小鼠蛻膜組織,加入2.5%戊二醛進(jìn)行預(yù)固定,1%鋨酸進(jìn)行后固定,再逐級(jí)用乙醇和丙酮進(jìn)行脫水,樹脂包埋,制備成超薄切片,醋酸雙氧鈾-硝酸鉛溶液進(jìn)行雙重染色,置投射電鏡下進(jìn)行觀察。
3.免疫組化分析局部組織細(xì)胞因子STAT3、STAT5表達(dá):
4.RT-PCR檢測(cè)蛻膜組織中的FOXP3、RORrt、STAT3、STAT5 mRNA表達(dá)。
5.Western blot檢測(cè)蛻膜組織中的STAT3、STAT5蛋白表達(dá)
標(biāo)志因子水平
6.1ELISA檢測(cè)脫膜組織勻漿中的IL-2、IL-6。
收集各組蛻膜組織,組織勻漿后取上清進(jìn)行ELISA檢測(cè)。
6.2ELISA檢測(cè)細(xì)胞因子IL-2、IL-6和TGF-β1表達(dá):
取各小鼠血清,使用IL-2、IL-6和TGF-β1 ELISA kit,按照試劑盒說明書進(jìn)行操作,在酶標(biāo)儀上設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線,每個(gè)標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品均設(shè)3個(gè)復(fù)孔。用酶標(biāo)儀讀取血清樣本的吸光度值(A),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度值。
統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x ±s)表示,采用t檢驗(yàn),組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯
贈(zèng)品
增值服務(wù)
組織/切片定制服務(wù)
血清定制服務(wù)
免疫組織化學(xué)(IHC)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
小動(dòng)物體內(nèi)成像實(shí)驗(yàn)服務(wù)
小動(dòng)物微型CT成像實(shí)驗(yàn)服務(wù)
小動(dòng)物核磁共振(MRI)成像實(shí)驗(yàn)服務(wù)
小動(dòng)物超聲成像實(shí)驗(yàn)服務(wù)
透射電鏡(TEM)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
掃描電鏡(SEM)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
學(xué)習(xí)與記憶行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
焦慮與抑郁行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
藥物成癮行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
疼痛行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
神經(jīng)精神異常行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
疲勞行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
一氧化氮測(cè)定試劑盒 (A012)
一氧化氮測(cè)定試劑盒 (A013-2)
總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒A015-2)
總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒(A015-1)
超氧化物歧化酶試劑盒
果糖檢測(cè)試劑盒
檸檬酸檢測(cè)試劑盒
過氧化氫酶檢測(cè)試劑盒
丙二醛檢測(cè)試劑盒
谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶試劑盒
還原型谷胱甘肽測(cè)定試劑盒
谷胱甘肽還原酶活性系數(shù)測(cè)定試劑盒
血管緊張素轉(zhuǎn)換酶測(cè)定試劑盒
谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)試劑盒
流式熒光發(fā)光法檢測(cè)試劑盒定制服務(wù)
云克隆多因子檢測(cè)試劑盒
相關(guān)產(chǎn)品
編號(hào) | 適用物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) | 應(yīng)用(僅供研究使用,不用于臨床診斷!) |
DSI638Mu01 | 自然流產(chǎn)(SA)小鼠模型 | 可用于研究預(yù)防和治療RSA的藥物 |