蛛網(wǎng)膜下腔出血(SH)大鼠模型
Rat Model for Subarachnoid Hemorrhage (SH)
SAH
- 編號(hào)DSI691Ra02
- 物種Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 相同的名稱,不同的物種。
- 原型物種Human
- 來(lái)源枕大池注血法
- 模式動(dòng)物品系SPF級(jí)SD大鼠,健康,6~8W,雄性,體重為180g-200g。
- 實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)分六組:正常對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥組、受試藥組三個(gè)劑量組。
- 實(shí)驗(yàn)周期4-6 weeks
- 建模方法SAH動(dòng)物模型的構(gòu)建:大鼠稱重后以10%水合氯醛按0.4g/kg腹腔麻醉,麻醉成功后剃除顱頂部毛發(fā),取俯臥位,將動(dòng)物頭部固定于腦立體定位儀上,保持顱頂水平位置。手術(shù)區(qū)常規(guī)消毒,沿顱頂正中矢狀線切開(kāi)長(zhǎng)約2cm皮膚,鈍性分離肌肉及骨膜,雙氧水消毒及止血,在距前囪正中線前6mm、中線旁開(kāi)2~3cm處,用5mL注射器針頭鉆孔,手術(shù)顯微鏡下用4號(hào)針頭小心將腦膜挑破,見(jiàn)清亮腦脊液流出時(shí),在矢狀面將導(dǎo)管向前傾斜30°插入,直至尖端達(dá)前顱窩底,深度距大腦表面約1.0cm。骨孔用骨蠟密封住。連接注射器輕柔抽吸,見(jiàn)清亮腦脊液流出后,證實(shí)進(jìn)入蛛網(wǎng)膜下腔。局部消毒后剪除長(zhǎng)約2cm鼠尾,快速接取鼠尾動(dòng)脈血300μL,用微量注射注入蛛網(wǎng)膜下腔,注射時(shí)間為20s。拔出導(dǎo)管,醫(yī)用生物膠封閉骨孔,逐層縫合皮膚,放入保暖箱內(nèi)。大鼠麻醉蘇醒后放回飼養(yǎng)箱飼養(yǎng)并觀察。
- 應(yīng)用用于研究蛛網(wǎng)膜下腔引起的腦部損傷
- 下載 英文說(shuō)明書 中文說(shuō)明書
- 規(guī)格 每例
- 價(jià)格 ¥ 1560
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模型評(píng)價(jià)
1 大體觀察
觀察各組大鼠腦表面周圍的積血/血凝塊情況。
2 神經(jīng)認(rèn)知功能評(píng)分
分別于損傷后48h,參照Kaoutzanis等的行為學(xué)評(píng)分:
自由進(jìn)食2分,拒絕進(jìn)食1分;
運(yùn)動(dòng)反應(yīng):自由行走5分,行走困難4分,不能行走3分。
刺痛時(shí)肢體收縮2分,刺痛時(shí)無(wú)反應(yīng)1分;
睜眼反應(yīng):自行睜眼4分,聲音刺激睜眼3分,刺痛睜眼2分,不能睜眼1分??偡?1分。
3 生理學(xué)檢測(cè)
測(cè)定血腦屏障的變化。
血腦屏障滲透性測(cè)定:
⑴腦組織中伊文氏藍(lán)(EB)含量的測(cè)定參照周永剛等方法,首先建立標(biāo)準(zhǔn)回歸曲線,取EB 10mg溶于100ml生理鹽水中,取0.1ml加入1.9ml甲酰胺中混勻作為第一管,再?gòu)闹腥?.1ml加入1.9ml甲酰胺中混勻作為第二管,依次取1ml加入1ml甲酰胺中混勻作為第三管,類推并共做6管,37℃水浴48h,采用熒光分光光度儀610nm進(jìn)行比色,蒸餾水做空白。按公式計(jì)算腦組織EB含量:腦組織EB含量(μg/g腦組織):A×甲酰胺量(mL)÷腦濕重(g)(A為根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程,求得的樣品EB含量,單位為ng/mg)。
⑵各組大鼠于處死前1h經(jīng)股靜脈注射2%伊文氏藍(lán)(EB)2ml/kg,為清除血液中染料,用穿刺針向左心室關(guān)注生理鹽水,直至右心室流出清澈透明液體為止,開(kāi)顱快速切取大鼠顳底皮層腦組織稱重。將樣品放入盛有50%三氯乙酸(TCA)溶液1.5ml的勻漿器中,勻漿和離心(10000r/min,20min),取上清液1.0ml,放入1.5ml混合液(50%TCA和無(wú)水乙醇按1:3比例配制而成),充分混勻。檢測(cè)。
組織病理學(xué)
4 HE染色:
在SD大鼠成功建模48h后,給予10%水合氯醛進(jìn)行腹腔注射麻醉(3-4ml/kg),立即進(jìn)行斷頭取腦組織,取血凝塊周圍的腦皮層組織,用于觀測(cè)各組老鼠腦組織損傷情況,切片進(jìn)行全景掃描。
5 免疫組化
取血凝塊周圍的腦皮層組織,使用MBL-C抗體檢測(cè),切片進(jìn)行全景掃描。
6 原位細(xì)胞凋亡檢測(cè)TUNEL實(shí)驗(yàn)
取血凝塊周圍的腦皮層組織,檢測(cè)各組大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后組織細(xì)胞的凋亡情況。切片進(jìn)行熒光全景掃描。
7 WB檢測(cè)蛋白質(zhì)表達(dá)
取血凝塊周圍的腦皮層組織檢測(cè)MBL-2、C3、TLR4、p65、p-p65表達(dá)水平。
標(biāo)志因子水平
統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x ±s)表示,采用t檢驗(yàn),組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯
贈(zèng)品
增值服務(wù)
組織/切片定制服務(wù)
血清定制服務(wù)
免疫組織化學(xué)(IHC)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
小動(dòng)物體內(nèi)成像實(shí)驗(yàn)服務(wù)
小動(dòng)物微型CT成像實(shí)驗(yàn)服務(wù)
小動(dòng)物核磁共振(MRI)成像實(shí)驗(yàn)服務(wù)
小動(dòng)物超聲成像實(shí)驗(yàn)服務(wù)
透射電鏡(TEM)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
掃描電鏡(SEM)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
學(xué)習(xí)與記憶行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
焦慮與抑郁行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
藥物成癮行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
疼痛行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
神經(jīng)精神異常行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
疲勞行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
一氧化氮測(cè)定試劑盒 (A012)
一氧化氮測(cè)定試劑盒 (A013-2)
總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒A015-2)
總抗氧化能力檢測(cè)試劑盒(A015-1)
超氧化物歧化酶試劑盒
果糖檢測(cè)試劑盒
檸檬酸檢測(cè)試劑盒
過(guò)氧化氫酶檢測(cè)試劑盒
丙二醛檢測(cè)試劑盒
谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶試劑盒
還原型谷胱甘肽測(cè)定試劑盒
谷胱甘肽還原酶活性系數(shù)測(cè)定試劑盒
血管緊張素轉(zhuǎn)換酶測(cè)定試劑盒
谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)試劑盒
流式熒光發(fā)光法檢測(cè)試劑盒定制服務(wù)
云克隆多因子檢測(cè)試劑盒
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